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當(dāng)前位置：首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > BIOHUB > 分子生物學(xué) > 78CH10001Skim milk powder脫脂奶粉（WB專用）
簡(jiǎn)要描述：脫脂奶粉，脂肪含量低，蛋白含量高。配制成0.3~5%的水溶液使用。
產(chǎn)品型號(hào)：78CH10001 廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商更新時(shí)間：2024-08-12訪 問 量：772產(chǎn)品分類
詳細(xì)介紹
| 品牌 | BIOHUB | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 作為抗體反應(yīng)等的印跡封閉溶液使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
western blot中脫脂奶粉的作用
封閉
原理：用非抗原的蛋白去封閉膜的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)，避免標(biāo)記抗體固定在膜上引起背景增高，常用的封閉液有BSA,脫脂奶粉,明膠, tween-20等,一般脫脂奶粉。
實(shí)驗(yàn)步驟：
5%脫脂奶粉（用1x TBS配制，或1xTBST配制）封閉一晚上 或室溫1~2小時(shí)
當(dāng)一抗為抗磷酸化抗體時(shí)，脫脂奶粉由于含有較多磷酸化蛋白，請(qǐng)改為使用BSA。
2，一抗、二抗孵育
原理： 一抗可以與要檢測(cè)的蛋白特異結(jié)合，二抗可與一抗結(jié)合，同時(shí)二抗上帶有特異的酶（如辣根過氧化物酶HRP，堿性磷酸酶法AP等 ),標(biāo)記酶可以分解化學(xué)顯色底物產(chǎn)生有顏色的條帶或催化化學(xué)發(fā)光底物使膠片感光。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一抗孵育：5%脫脂奶粉稀釋一抗到合適的濃度，與膜室溫孵育1小時(shí)或4度一晚上（抗體濃度及孵育時(shí)間需根據(jù)不同的抗體做相應(yīng)調(diào)整， 1xTBST，洗膜3次，每次5分鐘。
二抗孵育：5%脫脂奶粉稀釋二抗到合適的濃度，與膜室溫孵育1小時(shí)， 1x TBST,洗膜3次，每次5分鐘。
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