組織解離液

組織解離液適用于脾臟、肝臟、腎臟、胰腺、胃黏膜組織、腫瘤組織等多種組織的細(xì)胞分離。解離組織獲得的細(xì)胞具有高活性，可保留細(xì)胞的表面抗原等特點，細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞分選、藥物篩選、單細(xì)胞測序等。

1.           取新鮮組織100mg左右加至無菌離心管中，將其剪碎至1-2mm³，加入組織解離液1 mL。

2.           將離心管置于恒溫?fù)u床上，37℃、180rpm震蕩孵育10-30min消化組織，可根據(jù)組織的不同適當(dāng)縮短或延長消化時間。

3.           孵育結(jié)束后將離心管內(nèi)的組織勻漿用70µm無菌過濾器過濾，然后加入細(xì)胞培養(yǎng)基沖洗過濾器，用離心管收集濾液。

4.           將細(xì)胞懸液1200rpm離心5min，棄上清。

5.           再加入適量培養(yǎng)基，1200rpm離心5min，棄上清。

6.           用細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，取少量細(xì)胞鏡下觀察消化情況。

7.           根據(jù)需要將細(xì)胞用于后續(xù)實驗。

8.           （可選）可使用紅細(xì)胞裂解液去除組織解離過程中的紅細(xì)胞或死細(xì)胞。