咨詢電話:13308436663

      當前位置:首頁   >  產品中心  >    >  BIOHUB  >  線性聚乙烯亞胺PEI MW25000

      線性聚乙烯亞胺PEI MW25000

      簡要描述:BIOHUB 線性聚乙烯亞胺PEI MW25000 轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產品,因其較高的轉染效果,已廣泛應用于AAV,LV和重組蛋白等工業化生產。

      聚乙烯亞胺是一種具有較高陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔兩個碳原子,即每第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"體(proton sponge)

      • 產品型號:
      • 廠商性質:經銷商
      • 更新時間:2024-07-17
      • 訪  問  量:3740

      詳細介紹

      品牌BIOHUB供貨周期一個月
      應用領域生物產業

      基本信息CAS:9002-98-6

      分子式:(CH2CH2NH)n

      分子量:25,000

      熔點:73-75℃

      溶解性:溶于熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;

      不溶于:苯、、yi醚、丙酮

      形式:白色固體

      生物毒性:未知

      安全防護:手套及口罩

      存儲:PEI 內含自由氨基,建議開封后 4℃干燥保存,減緩氧化過程。

      效期:3年 

      運輸:常溫

      特點大量實驗數據反饋細胞通用性好,有非常好的轉染效果,尤其對293,CHO細胞系有特別顯著的轉染效果。

      配置方法

       

       

      轉染操作流程:(貼壁細胞轉染方法)

          1. 接種細胞: 轉染前一天,用膠原酶(BIOHUB Cat#78CL10002)消化細 胞并計數。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置 入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到 70~80%。

          2. 準備 DNA-PEI 復合物: DNA、PEI 試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升 至室溫。依據表 1 所示,用 Opti-MEM ITM或其他適合的無蛋白培 養基稀釋適量 DNA。用同樣的培養基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線 性 PEI 轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批 DNA 比例可 能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液的試管,一邊將稀釋的線性 PEI 轉染 試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置 10~25 min 以形成 DNA-PEI 復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 離心管。

          3. 轉染細胞: 直接向每個孔中加入 DNA-PEI 復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在 無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴 DNA-PEI 復合 物。轉染 3 h 后,添加½體積的包含 30%血清的生長培養基。

          4. 孵育細胞和分析結果: 在 CO2 培養箱中 37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染 后最快 7 h 即可檢測到轉入基因的表達。

          5. 轉染 24 h 后,將細胞傳代至新鮮的生長培養基中(將細胞稀釋 10 倍 以上),在 CO2 培養箱中 37℃孵育過夜。第二天加入與轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約 1~2 周可 篩選到耐藥性克隆,在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養基。

       

      轉染操作流程:(懸浮細胞轉染方法)

       

          1. 轉染前準備:懸浮細胞傳代接種于適量含懸浮細胞生長培養基中,合適條件下培養。根據培養瓶大小調整細胞密度(例100mL培養瓶,1X10 6 cells/mL),然后旋緊瓶口放入搖床繼續培養,2~4小時后可以進行轉染。

       

          2. 準備 DNA-PEI 復合物:DNA、PEI 試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室。用 Opti-MEM ITM或其他適合的無血清培養基稀釋適量 DNA。用同樣的培養基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置 10~25 min 以形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 離心管。

       

          3. 轉染細胞:PEI-DNA轉染復合物逐滴加入到細胞培養液中,搖勻后旋緊瓶口放回搖床合適培養條件下培養至可以分析檢測

       

          4. 孵育細胞和分析結果:轉染后一般24-72h即可檢測到轉入基因的表達。 請自行確定適合檢測時間。

       

          5. 如果要獲得更多的蛋白產量,有文獻表明轉染后24小時,可以適當稀釋細胞,稀釋比例參考范圍(1:11:5之間,可以增加蛋白產量,稀釋效應與最佳稀釋比率應根據經驗確定


      產品背景

           BIOHUB 生產的78Bio PEI是一種優化的線性陽離子聚合物轉染試劑,分子量分別為 25000 和 40000,78BioPEI40000 相比 25000 轉染效率高,但毒性也略大于 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表達系統中,相比于市面上的脂質體 78BioPEI 都表現出高的蛋白表達量(無 論是 96 孔板還是 100L 的細胞反應器),以及更小的細胞毒性、更高的轉染效和更高的可 重復性,并且十分經濟的高性價比轉染試劑。產品具有以下特點:

      1.轉染效率高,細胞毒性低;  蛋白表達量高;

      2.節約成本:BIOHUB 78 PEI轉染試劑 ,進口品質,親民價格,至少能夠降 40% 的轉染試劑總成本;

      3.適用于 HEK293 等真核細胞的轉染;

      4.適用于貼壁細胞和懸浮細胞的轉染;

      5.適用于有血清和無血清的轉染條件;

      6. 無機試劑,無動物源成分;

      7. 產品穩定,質控嚴格;

      8. 工藝流程適用范圍廣,容易優化 適合小規模培養板,培養瓶到大規模的生物反應器。

      注意事項

        1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

        2. 本產品主要用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

        3.加熱或加酸都有助于 78BioPEI 溶解。當然酸可能不用加那么多,詳細用量可試加一點 ,攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到 pH 那么低。 

        4.一定要溶解充分,溶解不充分會影響后續的轉染效率.

        5.冷凍后可能會影響其后續轉染效果。

       

       

      產品咨詢

      留言框

      • 產品:

      • 您的單位:

      • 您的姓名:

      • 聯系電話:

      • 常用郵箱:

      • 省份:

      • 詳細地址:

      • 補充說明:

      • 驗證碼:

        請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
      掃碼關注

      郵箱:xs1@78bio.com

      地址:上海市浦東新區川沙新鎮6619號

      版權所有©2025 上海起發生物科技有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2022022359號-2    sitemap.xml    管理登陸    技術支持:化工儀器網
      主站蜘蛛池模板: 人妻少妇精品视频三区二区一区| 精品无码一区二区三区爱欲| 少妇精品久久久一区二区三区 | 久久婷婷久久一区二区三区| 国内自拍视频一区二区三区| 好湿好大硬得深一点动态图91精品福利一区二区 | 国产激情精品一区二区三区| 日韩精品人妻一区二区三区四区 | 嫩B人妻精品一区二区三区| 影院成人区精品一区二区婷婷丽春院影视| 综合久久一区二区三区 | 波多野结衣在线观看一区| 亚洲图片一区二区| 内射女校花一区二区三区| 福利一区国产原创多挂探花| 精品国产福利在线观看一区| 亚洲高清一区二区三区| 日韩精品一区二区三区老鸭窝 | 欧美日韩一区二区成人午夜电影| 无码日韩精品一区二区免费暖暖| 国产福利电影一区二区三区| 精品一区二区三区中文| 欧美人妻一区黄a片| 毛片一区二区三区无码| 亚洲丶国产丶欧美一区二区三区| 亚洲一区在线视频观看| 青青青国产精品一区二区| 色一乱一伦一图一区二区精品| 精品aⅴ一区二区三区| 国产波霸爆乳一区二区 | 日韩一区二区三区视频| 无码人妻一区二区三区精品视频 | 狠狠色婷婷久久一区二区| 精品免费久久久久国产一区| 精品国产亚洲一区二区在线观看| 久久精品无码一区二区日韩AV| 国产精品一区在线观看你懂的| 中文字幕精品一区| 亚洲视频在线一区二区三区| 国产精品高清一区二区人妖| 国产精品无码一区二区在线观|