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      2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液( long fragment PCR Master Mix)說明書

      更新時(shí)間:2023-10-24      點(diǎn)擊次數(shù):463

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      使用方法
      1. 充分溶解并混勻PCR反應(yīng)所需的各種溶液。將2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液( long fragment PCR Master Mix)置于冰浴上或冰盒內(nèi)。參考下表在冰上設(shè)置PCR反應(yīng):

      Component20uL RXN25uL RXN50uL RXNFinal Concentration
      2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液10uL12.5uL25uL1 ×
      10uM Forward Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
      10uM Reverse Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
      Template DNAvariablevariablevariablevariable
      Nuclease-Free Waterto 20uLto 25uLto 50uL
      2 . 不同模板最佳反應(yīng)濃度有所不同,反應(yīng)體系推薦模板使用量可參見下表。
      Template DNA20uLRXN25uL RXN50uL RXN
      Genomic DNA4ng-0.4ug5ng-0.5ug10ng-1ug
      Plasmid or Vrial4pg-4ng5pg-5ng10pg-10ng
      cDNA4pg-0.4ug5pg-0.5ug10pg-1ug
      3. 用移液器輕輕吹打混勻或輕微Vortex混勻,室溫離心數(shù)秒,使液體積聚于管底。
      反應(yīng)程序
      1 .退火溫度應(yīng)根據(jù)引物Tm值進(jìn)行調(diào)整(50-72℃)。
      2. 延伸時(shí)間需根據(jù)擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度和復(fù)雜性進(jìn)行調(diào)整。
      3. 各設(shè)置好的PCR反應(yīng)管置于PCR儀上,開始PCR反應(yīng)。
      STEPTEMPTIME
      Initial Denaturation98°C30 sec
      25–35 Cycles98°C10 sec

      50–72 °C15 sec

      72°C15-30 sec/kb
      Final Extension72°C5 min
      Hold4–10 °C
      運(yùn)輸及保存方法
      -20℃ 保存 一年 干冰運(yùn)輸


      貨號(hào)品名規(guī)格品牌
      78DC10152-1ml2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液(long fragment PCR Master Mix)1mlBIOHUB
      78DC10152-5ml2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液(long fragment PCR Master Mix)5mlBIOHUB
      78DC10152-3*5ml2x 長(zhǎng)片段PCR 擴(kuò)增 預(yù)混液(long fragment PCR Master Mix)3*5mlBIOHUB







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