Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)說明書

     BIOHUB的CCK-8試劑盒是用白色的WST-8固體粉末配置的，顏色為粉紅色，保存期更長，實驗重復性更好！ WST-8(水溶性四唑（2-（2-甲氧基-4硝基苯）-3-(4-硝基苯)-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽），是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的甲臜染料(formazan,下圖)， 這種甲臜染料直接溶解在培養(yǎng)基中。水溶性四唑被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠。細胞增殖越多越快，則培養(yǎng)基的顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比，顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關(guān)系。正是利用這一特性開發(fā)的CCK-8試劑盒直接進行細胞增殖和毒性分析。CCK-8法應用非常廣泛，可以用于生物活性因子的活性檢測，抗腫瘤藥物的篩選，細胞增值的測定，細胞毒性檢測以及藥敏等與細胞活性和增殖相關(guān)的實驗。本試劑盒使用方便，試劑盒包含一管已經(jīng)配制好的含有水溶性四唑的CCK-8溶液，即開即用，無需其他準備步驟。檢測過程也無需采用額外的步驟去溶解甲臜，可直接使用96孔板或者384孔板在酶標儀上檢測，適合大規(guī)模高通量的樣品檢測。

                                  CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較

     CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高，操作簡便，使用安全，重現(xiàn)性好的細胞增殖與活性檢測方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無需有機溶劑和放射性同位素，步驟少，無損失，結(jié)果準確！本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。

     1.MTT實驗生成的甲臜不是水溶性的，需要使用DMSO等有機溶劑溶解；而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的，不僅省去了溶解的步驟，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差。

     2.與MTT方法相比，本方法線性范圍更寬，靈敏度更高。本方法對細胞無損害，因此加入CCK-8顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)多次測定從而找到最佳測定時間。

     3.本方法所用試劑在培養(yǎng)基中比MTT更加穩(wěn)定，實驗效果重復性好。

     4.MTT具有毒性，同時其生成的甲臜需要有機溶劑溶解，會對操作人員身體造成危害。本試劑無毒，使用中無需有機溶劑，操作更加安全。

     5.本試劑盒在4℃避光可長期保存，使用無需配制，即開即用。

     6.酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾（扣除空白孔即可）

CCK-8溶液在避光，0-5℃的條件下可以保存一年； -20℃下保存2年；如需經(jīng)常使用請將試劑存放在0-5℃，為防止背景值增加干擾實驗結(jié)果，請勿反復凍融。

1.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2.本產(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。